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本试剂盒基于性能卓越的Bst4.0 DNA聚合酶，用于模板DNA或RNA的LAMP等温扩增。

LAMP是一种新型核酸扩增技术，采用4或6条能够识别目的基因上的6个特异区域的引物，依赖于Bst DNA聚合酶的强链置换活性，在30～60分钟内DNA扩增可达10⁹～10¹⁰倍。本试剂盒为冻干制品，相对于液体型产品更加稳定，灵敏度更高，操作更加方便，通常在30min内完成检测。

Bst DNA聚合酶是Bacillus stearothermophilus DNA聚合酶的一部分，具有很强的链置换活性，以及5'→3'的DNA聚合酶活性，因此可以应用于LAMP实验。本制品内含Bst4.0 DNA聚合酶因此既可以扩增DNA，也可以直接扩增RNA分子。

在LAMP的高效反应过程中会产生大量的焦磷酸根离子，其与镁离子结合形成焦磷酸镁白色沉淀，因此在实验过程中可通过检测反应液的浊度变化进行实时定量检测。也可在反应结束后肉眼直接观察焦磷酸镁沉淀，根据是否形成白色沉淀来判断反应是否发生。

• Lyophilized LAMP Turbidity Reagent为干粉形式，包含Bst DNA聚合酶4.0、dNTPs等，在未溶解前，该制品可-20℃长期保存，并可室温运输，性能无下降。使用前每瓶用750μL的LAMP Buffer溶解后，可立即使用，剩余试剂可在-20℃保存1个月，在-60℃以下长期保存。
  
• 按下表配制反应混合液
  

  成分	用量
  溶解后的LAMP Turbidity Reagent	15μL
  LAMP Primer Mix	1 or 1.5 or 2μL
  模板DNA or RNA	1μL
  ddH2O	至20μL

  
  首次实验时LAMP Primer Mix分别采用1、1.5、2μL进行实验测试。
  
• 反应体系配好后，充分混匀并短暂离心，置于60～65℃进行反应（首次实验采用60℃），连接LAMP实时浊度仪，对浊度变化进行实时检测。也可肉眼分别于20、25、30、45min观察浊度变化。
  
  • 在LAMP反应结束后禁止将反应管盖打开，否则可能会导致气溶胶污染。一旦发生气溶胶污染，请使用百奥莱博的气溶胶DNA污染去除剂（MT3001）进行环境清理。

• LAMP Primer Mix浓度：FIP/BIP分别为16μM、LoopF/B分别为8μM、F3/B3分别为2μM。
  
• 四个重要的参数，将对成功建立LAMP检测方法至关重要，分别是引物位置、引物使用浓度、反应温度、反应时间。引物使用浓度、反应温度、反应时间是优先要确认的参数，如经过参数调整后仍不能达到检测用标准，则重新设计引物组合，再进行测试。